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embrionario humano
células renales

 

Resumen

 

La producción de moléculas bioquímicas complejas como vectores virales y proteínas recombinantes depende de las expresiones basadas en células de mamíferos ( Ho & Too, 2020; Sennesael et al., 2018 ). A pesar de que la mayoría de los productos bioterapéuticos disponibles se producen en líneas celulares de animales, la producción en líneas celulares humanas se está expandiendo actualmente ( Zhao et al., 2020 ; Abaandou et al., 2021 ). El uso de líneas celulares humanas se ha asociado con un mayor potencial, lo que promueve modificaciones postraduccionales más "similares a las humanas" que llevarán a cabo los productos bioterapéuticos resultantes ( Deng et al., 2020 ; Leinonen et al., 2020 ; İlhan , 2021 ). Entre todas las líneas celulares humanas, el riñón embrionario humano (HEK293) se usa ampliamente debido a su rápida tasa de crecimiento, alta reflectividad y capacidad para crecer en cultivos en suspensión sin suero (Dohogne et al., 2019; Bezeljak, 2022; Chen et al. al., 2018). En este artículo, discutimos cuál es la producción del vector viral en HEK293, además de su historia derivada. También elaboramos sobre los usos de HEK293 y la ética que rodea estos usos, entre otros aspectos.

 

Introducción

       

El desarrollo de la mayoría de los productos biofarmacéuticos se basa principalmente en líneas celulares humanas, donde los productos terapéuticos se fabrican en células de ovario de hámster chino (CHO) (Labant, 2021). El uso de líneas celulares humanas le permite producir modificaciones postraduccionales (PTM) complejas (Maldonado et al., 2020; (Vaitkienė et al., 2020). Los productos biológicos como la coagulación, el crecimiento y los anticuerpos se consideran complejos y requieren PTM complejos para mantener la eficacia y la estabilidad del producto (Do Minh & Kamen, 2021; Aponte-Ubillus et al., 2018; Egan et al., 2018). La mayoría de los vectores virales terapéuticos y algunas proteínas recombinantes requieren PTM que no se pueden encontrar en CHO, por lo que se producen en HEK293 (Selvaraj et al., 2021; Pulix et al., 2021; Dehbashi et al., 2019; Wu et al., 2019).Desde 2015, la Asociación de Alimentos y Medicamentos (FDA) aprobó solo siete productos derivados de HEK , de los cuales seis son principalmente terapias celulares y génicas, mientras que la línea celular HEK293 y sus derivados fueron utilizados en la producción de vectores virales (Arena et al., 2019; Pantina et al., 2019; Maldonado et al., 2020). de este trabajo es ilustrar la producción de vectores virales en HEK293 y sus derivados.

 

HEK293 Derivados y usos

 

La línea celular HEK293 se desarrolló mediante la transformación de células renales embrionarias de humanos con ADN Ad5. Desde entonces, se han desarrollado varios otros tipos y derivados de HEK293, y HEK293-F y HEK293-T se utilizan con frecuencia para producir productos biofarmacéuticos (Raghavan et al., 2019). Otros derivados de HEK293 comúnmente utilizados en la producción de proteína recombinante incluyen HEK293-6E y HEK293-E, que se creó a través de la expresión genética del antígeno nuclear 1 de Epstein-Barr (EBNA-1) que permite la replicación episomal de plásmidos que contienen oriP. (Lavado-García et al., 2021; Fu et al., 2019; Xiao et al., 2017). Los estudios muestran que HEK293-6E muestra un crecimiento celular mejorado y una expresión génica transitoria en comparación con HEK293-E. Otros usos de HEK293 incluyen la investigación de ingeniería genética sobre el desarrollo de virus y proteínas terapéuticos para promover la terapia génica.

Consideraciones éticas  

     

​ Desde un punto de vista ético, toda vida humana debe ser respetada y protegida desde el principio (Fuenmayor et al., 2017). A lo largo de los años, muchos asumieron que HEK293 se derivó de un aborto médicamente innecesario. La iglesia también ha reforzado esta enseñanza (Sharipova et al., 2017). Sin embargo, ese no puede ser el caso. La razón principal es que el aborto era ilegal en los Países Bajos debido a las Leyes de moralidad de 1911. Legalmente, los médicos solo podían realizar un aborto si la vida de la madre estaba en peligro. De lo contrario, la práctica estaba estrictamente prohibida ( Abortion in the Netherlands, 2021 ).

Premios y logros

      

El HEK293 se ha ganado su lugar en la producción de productos biofarmacéuticos (Lecomte et al., 2020; Shahid et al., 2021). Además, su capacidad para crecer sin esfuerzo en cultivos en suspensión sin suero y su capacidad de transfección hacen que esta línea celular sea la más crucial en la producción de productos terapéuticos destinados al uso humano, siguiendo su origen humano (Sharon & Kamen, 2017). Por el momento, las propiedades de producción y crecimiento de HEK293 son inferiores en comparación con las líneas celulares no humanas, como las líneas celulares NSO y CHO de mieloma urinario (Ayala-Lujan & Ruiz-Perez, 2018; Le Bec, 2020). Sin embargo, las modificaciones genéticas involucradas en procesos celulares como el metabolismo, la apoptosis, la proliferación de células, la glicosilación, el plegamiento de proteínas y la secreción, además de la optimización de vectores, medios y bioprocesos, han mejorado significativamente el desempeño de esta línea celular (Moleirinho et al. ., 2019; Malm et al., 2020).

 

 

Conclusión

 

HEK293, junto con otras líneas celulares humanas, actualmente sirve como el nicho más valioso para desarrollar productos biofarmacéuticos que necesitan PTM humanos (Strobel et al., 2019; Masri et al., 2019). También se considera la línea celular más apropiada para producir vectores de terapia génica recombinantes como los virus adenoasociados (AAV)  (Abaandou & Shiloach, 2018). Sin embargo, se supone que el avance tecnológico continuo y las inversiones en investigación optimizarán aún más esta línea celular en la producción de productos bioterapéuticos seguros y efectivos.

 

 

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